14.3: DNA 复制的基础知识
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- 解释 DNA 的结构如何揭示复制过程
- 描述 Meselson 和 Stahl 实验
对双螺旋结构的阐明暗示了DNA是如何分裂和复制自身的。 该模型表明,在复制过程中,双螺旋的两条链是分开的,每条线都充当了复制新的互补链的模板。 目前尚不清楚的是复制是如何进行的。 建议了三种模型(图\(\PageIndex{1}\)):保守型、半保守型和分散型。
在保守复制中,亲本的DNA保持在一起,而新形成的子链在一起。 半保守的方法表明,两条亲本DNA链中的每条都充当合成新DNA的模板;复制后,每个双链DNA包括一条亲本或 “旧” 链和一条 “新” 链。 在分散模型中,两个DNA拷贝都有亲本DNA的双链片段,新合成的DNA穿插在一起。
梅塞尔森和斯塔尔有兴趣了解 DNA 是如何复制的。 他们在含有 “重” 氮同位素(15 N)的培养基中培育了好几代人的大肠杆菌,该同位素被掺入氮碱基中,最终融入到DNA中(图\(\PageIndex{2}\))。
然后,大肠杆菌培养物被转移到含有 14 N 的培养基中,并允许其生长一代。 细胞被采集并分离出DNA。 DNA 在超离心机中高速离心。 有些细胞被允许在 14 N 中再生长一个生命周期,然后再次旋转。 在密度梯度离心过程中,DNA被加载到梯度(通常是盐,例如氯化铯或蔗糖)中,然后以50,000至60,000 rpm的高速旋转。 在这种情况下,DNA将根据其梯度密度形成条带。 在 15 N 中生长的 DNA 的密度位置将高于 14 N 中生长的 DNA Meselson 和 Stahl 指出,在 14 N 从 15 N 转移后,在 14 N 中生长了一代之后,观察到的单波段在 DNA 之间处于中间位置细胞仅在 15 N 和 14 N 中生长。这表明复制模式要么是半保守的,要么是分散的。 从在 14 N 中生长了两代的细胞中采集的 DNA 形成了两个带:一个 DNA 带位于 15 N 和 14 N 之间的中间位置,另一个对应于 14 N DNA 的带。 只有当DNA以半保守的方式复制时,才能解释这些结果。 因此,排除了其他两种模式。
在DNA复制过程中,构成双螺旋的两条链中的每条都充当复制新链的模板。 新的链条将与父系或 “旧” 链相辅相成。 当两个子DNA拷贝形成时,它们具有相同的序列并平均分为两个子细胞。
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摘要
DNA复制模型表明,双螺旋的两条链在复制过程中分开,每条链都充当复制新的互补链的模板。 在保守复制中,亲本DNA是保守的,而子代DNA是新合成的。 半保守的方法表明,两条亲本DNA链中的每条都充当合成新DNA的模板;复制后,每个双链DNA包括一条亲本或 “旧” 链和一条 “新” 链。 分散模式表明,DNA的两个拷贝将有亲本DNA片段和新合成的DNA片段。


