20.E：免疫反应的实验室分析（练习）

20.1：单克隆和多克隆抗体的实际应用

除了对我们的正常免疫反应至关重要外，抗体还为研究和诊断目的提供了强大的工具。 抗体的高特异性使其成为检测和定量从药物到血清蛋白再到微生物等各种靶点的绝佳工具。 通过体外测定，抗体可用于沉淀可溶性抗原、凝集细胞以及中和药物、毒素和病毒。

多项选择

在实验室的许多用途中，多克隆抗体效果很好，但是对于某些类型的检测，它们缺乏足够的 ________，因为它们会与不适当的抗原发生交叉反应。

1. 特异性
2. 灵敏度
3. 准确性
4. 反应性

回答

一个

单克隆抗体是如何产生的？

1. 来自小鼠的产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合，然后在组织培养中生长。
2. 给小鼠注射抗原，然后从其血清中提取抗体。
3. 它们是由人体免疫系统产生的，是对感染的自然反应。
4. 它们是由小鼠的免疫系统产生的，是对感染的自然反应。

回答

一个

填空白

当我们在第一次注射几周后第二次给动物注射相同的抗原时，会发生________，这意味着第二次注射后产生的抗体平均会更紧密地结合抗原。

回答

亲和力成熟

当使用单克隆抗体治疗人类疾病时，必须首先将小鼠恒定区域 DNA 替换为人类恒定区域 DNA，从而使单克隆抗体为 ________。

回答

人性化

如果我们使用普通的小鼠单克隆抗体来治疗人类疾病，多剂量将导致患者对小鼠抗体产生______的反应。

回答

中和抗体

对感染的多克隆反应是由于大多数抗原具有多个 ________，

回答

表位

简短答案

描述多克隆抗体比单克隆抗体更有可能表现出交叉反应性的两个原因。

批判性思维

假设你在杂货店里筛选农产品是否存在大肠杆菌污染。 使用多克隆抗大肠杆菌抗血清或单克隆抗大肠杆菌膜蛋白会更好吗？ 解释一下。

20.2: 体外检测抗原抗体复合物

用于检测体外（例如在试管中）的抗体和抗原的实验室测试称为体外测定。 当溶液中同时存在抗体及其相应的抗原时，我们通常可以观察到沉淀反应，在这种反应中，大型复合物（晶格）形成并沉淀在溶液中。

多项选择

在 VDRL 测试中，________ 的形成是阳性结果。

1. 絮凝剂
2. 沉淀素
3. 凝固
4. 亮粉色

回答

一个

病毒中和试验的滴度是患者血清的最高稀释度

1. 其中没有可检测到的病毒 DNA。
2. 其中没有可检测到的病毒蛋白。
3. 这完全阻断了斑块的形成。
4. 可将斑块的形成减少至少 50%。

回答

D

在 Ouchterlony 测定中，我们看到抗原和抗血清之间形成了尖锐的沉淀素弧形。 为什么这条弧线在很长一段时间内都可见？

1. 抗体分子太大，无法通过琼脂扩散。
2. 沉淀素晶格太大，无法通过琼脂扩散。
3. 电弧形成后添加的甲醇会使蛋白质变性并阻断扩散。
4. 抗原分子与凝胶基质化学耦合。

回答

B

填空白

当缓慢地向抗血清中添加抗原时，沉淀素的含量会逐渐增加直到达到 ________；在此之后添加更多的抗原实际上会减少沉淀素的含量。

回答

等效区或等价区域

径向免疫扩散试验通过将 ________ 混合到凝胶中，然后让抗原从凝胶中的井口扩散出来，来定量抗原。

回答

抗血清

简短答案

解释为什么补体固定试验中的溶血是感染的阴性检测。

“中和抗体” 一词是什么意思？我们如何使用病毒中和测定来量化这种效应？

批判性思维

IgM 和 IgG 抗体均可用于沉淀反应。 但是，其中一类免疫球蛋白会形成比另一类低得多的浓度沉淀物。 这是哪个课，为什么在这方面效率要高得多？

20.3: 凝集测定

除了导致可溶性分子沉淀和悬浮分子絮凝外，抗体还可以在称为凝集的过程中将细胞或颗粒（例如抗原包衣的乳胶珠）聚集在一起。 凝集可用作是否存在针对细菌或红细胞的抗体的指标。 凝集测定通常在玻璃载玻片或微量滴定板上快速简便地进行。

多项选择

我们使用抗血清来区分细菌中的各种 ________。

1. 同型
2. serovars
3. 亚种
4. 线

回答

B

当使用抗血清来表征细菌时，我们通常会将抗体与 ________ 联系起来，以便更好地可视化凝集情况。

1. 乳胶珠
2. 红细胞
3. 其他细菌
4. 白细胞

回答

一个

与输血前血型分型一起进行的抗体筛查测试用于确保接受者

1. 没有以前未被发现的细菌或病毒感染。
2. 没有免疫功能低下。
3. 实际上确实有在线图表中列出的血型。
4. 不是在 ABO 或 Rh 系统之外制造抗原的抗体。

回答

D

库姆斯的直接测试旨在检测人们何时患有导致他们患病的疾病

1. 发烧过高。
2. 停止制造抗体。
3. 制造太多的红细胞。
4. 产生与自身红细胞结合的抗体。

回答

D

病毒血凝测定仅适用于某些类型的病毒，因为

1. 病毒必须能够直接交叉连接红细胞。
2. 病毒必须能够裂解红细胞。
3. 病毒一定不能裂解红细胞。
4. 其他病毒太危险了，无法在临床实验室环境中使用。

回答

一个

填空白

在主要的交叉比赛中，我们将________与捐赠者的红细胞混合，寻找凝集作用。

回答

患者血清

库姆斯的试剂是一种抗血清，其抗体与人类 ________ 结合。

回答

免疫球蛋白/抗体和/或补体

简短答案

解释为什么直接血凝测定的滴度是仍会导致血凝作用的最高稀释度，而在病毒血凝抑制测定中，滴度是未观察到血凝的最高稀释度。

当婴儿出生时患有黄疸时，为什么医生会下令直接进行库姆斯检查？

批判性思维

当捐献的血液短缺时，即使患者的血型不同，也可能会给他们输送O型阴性血液。 为什么会这样？ 如果 O 阴性血液供应耗尽，那么对于急需输血的不同血型患者来说，下一个最佳选择是什么？ 解释你的答案。

20.4：酶免疫测定（EIA）和酶联免疫吸附试验（ELISA）

酶免疫测定 (EIA) 用于可视化和量化抗原。 他们使用与酶偶联的抗体来结合抗原，然后该酶将底物转化为可观察的最终产物。 底物可以是染色原或氟原。 免疫染色是一种 EIA 技术，用于可视化组织中的细胞（免疫组织化学）或检查细胞内结构（免疫细胞化学）。 直接ELISA用于量化溶液中的抗原。

多项选择

在酶免疫分析中，酶

1. 与抗体的抗原结合位点结合。
2. 附着在微量滴定板的孔上。
3. 与疑似抗原偶联。
4. 与二级抗体的恒定区域结合。

回答

D

使用环境影响评估研究细胞内的微管或其他结构时，我们首先对细胞进行化学修复，然后用酒精处理细胞。 这种酒精治疗的目的是什么？

1. 它使细胞膜上的孔洞足够大，足以让抗体通过。
2. 它会使膜变粘，因此抗体会结合并被受体介导的内吞作用所吸收。
3. 它可以去除膜上的负电荷，否则会击退抗体。
4. 它可以防止抗体与细胞膜的非特异性结合。

回答

一个

在横向流妊娠试验中，你会在控制线上看到蓝带形态，而在测试线上没有波段形态。 这可能是 ________ 的妊娠试验。

1. 积极的
2. 假阳性
3. 假阴性
4. 负面的

回答

D

执行 FEIA 时，氟代替了 EIA 中使用的 ________。

1. 抗原
2. 显色底物
3. 酶
4. 二级抗体

回答

B

填空白

要使用 EIA 检测血液中针对细菌的抗体，我们将运行 a (n) ________，首先将细菌中的抗原附着在微量滴定板的孔中。

回答

间接 ELISA

简短答案

为什么在三明治 ELISA 中，抗原具有多个抗原表位很重要？ 为什么在这个测定中使用多克隆抗血清而不是单克隆抗体会更有利呢？

妊娠试纸可检测尿液中是否存在人绒毛膜促性腺激素。 这种激素最初由胎儿产生，后来由胎盘产生。 为什么试纸是本次测试的首选，而不是使用直接或间接的ELISA来获得更可量化的结果？

批判性思维

标记初级抗体和二级抗体，并讨论为什么最终产物的产生将与抗原的量成正比。

20.5：荧光自身抗体技术

通过将荧光标记物（氟原）附着在抗体的恒定区域上的荧光抗体（FA）技术，可以快速观察临床样本（如咽拭子或痰液）中的细菌，从而产生可快速使用、易于查看或测量的报告分子能够以高特异性与靶标标记物结合。 我们还可以标记细胞，使我们能够精确地量化细胞的特定亚群，甚至对其进行纯化以供进一步研究。

多项选择

假设您需要量化从流感中康复的患者血液中 CD8 T 细胞的水平。 您使用针对CD8的荧光单克隆抗体治疗患者的白细胞样本，将细胞通过流式细胞仪，然后生成如下所示的直方图。 左边峰下方的面积（蓝色）比右边峰的面积（红色）大三倍。 您可以从这些数据中得出什么结论？

1. 没有可检测到的 CD8 细胞。
2. CD4 细胞的数量是 CD8 细胞的三倍。
3. CD8 细胞的数量是 CD4 细胞的三倍。
4. CD8 细胞约占细胞总数的四分之一。

回答

D

在前一个问题中描述的数据中，第二个（红色）峰中细胞的平均荧光强度约为第一个（蓝色）峰值中的平均荧光强度________。

1. 三次
2. 100 次
3. 三分之一
4. 1000 次

回答

B

在直接荧光抗体测试中，我们最有可能使用荧光标记的单克隆抗体来寻找以下哪一项？

1. 患者样本中的细菌
2. 从患者身上分离出来并在琼脂板上生长的细菌
3. 将患者的抗血清涂在玻璃载玻片上
4. 来自与抗原包衣珠子结合的患者的抗血清

回答

一个

填空白

在流式细胞术中，使用对膜蛋白的荧光抗体标记细胞亚群。 当细胞通过探测器时，氟素会被 a (n) ________ 激活。

回答

激光

流式细胞仪中的荧光由与光源成一定角度的探测器测量。 还有一个在线检测器可以检测细胞团块或 ________。

回答

碎片

批判性思维

对疑似患有梅毒的患者同时使用 VDRL 测试和 IFA 进行检测。 IFA 测试结果呈阳性，但 VDRL 测试结果为阴性。 这些结果最可能的原因是什么？

临床医生怀疑肺炎患者可能感染了嗜肺军团菌。 简要描述为什么DFA测试可能比标准细菌学技术更适合检测这种病原体的两个原因。