Skip to main content
Library homepage
 
Global

8.9: דאגה

שיטה נוספת לאיתור אינטראקציות מולקולריות היא העברת אנרגיית תהודה פלואורסצנטית (FRET) - נקראת גם העברת אנרגיית תהודה Förster, העברת אנרגיית תהודה (RET) או העברת אנרגיה אלקטרונית (EET). הטכניקה מבוססת על התצפית שמולקולה הנרגשת מספיגת האור יכולה להעביר אנרגיה למולקולה סמוכה אם ספקטרום הפליטה של המולקולה הראשונה חופף לספקטרום העירור של השנייה (איור8.9.1) העברת אנרגיה זו יכולה להתרחש רק אם שתי המולקולות קרובות מספיק זו לזו (לא יותר מכמה ננומטר זה מזה).

איור8.9.1: ספקטרום עירור ופליטה עבור פלואורופורים תורמים ומקבלים ב- FRET. ויקיפדיה

בטכניקה, פלואורופור תורם או פלואורופור מקבל מחובר קוולנטית לשתי מולקולות מעניינות. הפלואורופור המקבל נועד לקבל אנרגיה ממולקולת התורם (קו מקווקו כתום באיור8.9.2) ולפלואורס באורך גל ייחודי (חץ אדום) כאשר הוא מקבל את האנרגיה הזו מהתורם.


איור8.9.2: העברת אנרגיית תהודה פלואורסצנטית בין כרומופורים תורמים ומקבלים. תמונה על ידי פהר ג'ייקובסון

יתר על כן, אורך הגל של האור שהתורם סופג מותאם באופן ייחודי לפלואורופור התורם ואין לו השפעה על הפלואורופור המקבל. הדרך היחידה שבה המקבל יכול להאיר היא אם הוא קרוב מספיק כדי לקבל אנרגיה המועברת מהתורם (חץ אדום). לקרינה זו יהיה גם אורך גל ייחודי. אם התורם והמקבל אינם קרובים מספיק זה לזה, התורם זורח ופולט אור המתאים לחץ הירוק או השחור. אלה אורכי גל שונים מזו של החץ האדום.

הניסוי מתחיל בתא בחלבון אחד עם פלואורופור תורם והחלבון השני עם פלואורופור מקבל. אור באורך גל שמרגש את הפלואורופור התורם זורח על התא. אם חלבון עם תורם מקיים אינטראקציה עם החלבון הנושא מקבל, אז מתרחשת העברת אנרגיה מהפלואורופור התורם למקבל ומתגלה הקרינה הייחודית (הקו האדום) של המקבל. אם שני החלבונים אינם מקיימים אינטראקציה, אז מתגלה פלואורסצנטיות מועטה או לא מהמקבל.